- -
UPV
 
Preparació de mostres per al microscopi de rastreig
Servei de Microscòpia Electrònica Preparació de mostres per al microscopi de rastreig  ...

Les mostres destinades al SEM han de complir dues condicions: han d’estar seques i ser conductores. El procés d’assecatge s’ha de portar a terme preservant al màxim l’estructura original de la mostra. Per a fer-ho, tenim dues alternatives: usar el mètode clàssic de fixació i deshidratació química que l’usuari fa al laboratori i que finalitza amb l’assecatge per punt crític a les nostres instal·lacions, o utilitzar el modern mètode de fixació física per criofixació que ja està acoblat a un dels microscopis.

En els dos casos la mostra necessita recobrir-se després amb un material que la faça conductora i en permeta l’observació al microscopi.

Recobriment de mostres a baix buit

Amb aquest mètode es fan dos tipus de recobriments: “spputtering” d’or per a obtenir les millors condicions d’imatge i, si es requereix microanàlisi per raigs X, el recobriment per fil de carboni.

Recobriment de mostres a alt buit

Les seues aplicacions van més enllà de la necessitat d’obtenir una mostra conductora per al SEM. Aconsegueix recobriments de gra molt més fi i està preparat per a fer “spputtering” amb diferents metalls. També treballa pel mètode d’evaporació, i així augmenta el rang de possibles elements de recobriment. Utilitza elèctrodes de carboni per a evaporar-lo i obtenir “films” que recobreixen les reixetes destinades al TEM.

Observació de mostres criofixades

El microscopi electrònic de rastreig (SEM) es pot dotar d’un sistema capaç d’observar la mostra a una temperatura molt baixa de manera que la seua preservació estructural és màxima i la capacitat de treball del microscopi no es veu afectada gens, perquè ja no tractem amb una mostra hidratada sinó congelada.

El procés s’inicia fora del microscopi, i refreda la mostra a la màxima velocitat possible mitjançant nitrogen neu. A continuació ja passa al sistema de crioobservació, on es pot fracturar, sublimar el gel superficial i recobrir amb or o carboni per observar-lo i/o analitzar-lo. L’avantatge d’aquest sistema és que es pot observar qualsevol mostra biològica o hidratada amb una preparació mínima i ràpida amb una bona preservació estructural.


EMAS upv